ISYNA1 Plasmide Double Nickase (h): sc-404785-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ISYNA1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ISYNA1 Double Nickase Plasmid (h) e il ISYNA1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ISYNA1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: ISYNA1 Antibody (C-9): sc-271830
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ISYNA1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404785-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ISYNA1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404785-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ISYNA1 codifica la mio-inositolo-3-fosfato sintasi 1, l’enzima limitante la velocità che converte il glucosio-6-fosfato in inositolo-3-fosfato, avviando la biosintesi de novo del mio-inositolo. Questa attività fornisce inositolo per la produzione di fosfatidilinositolo e di fosfati dell’inositolo, sostenendo la biogenesi delle membrane e le dinamiche di segnalazione legate a PI3K/AKT, il traffico vescicolare e l’omeostasi osmotica. Il metabolismo dell’inositolo dipendente da ISYNA1 contribuisce all’adattamento allo stress cellulare e influenza i programmi metabolici dei lipidi e dei carboidrati. La deregolazione delle vie dell’inositolo e dei fosfoinositidi è implicata nella neurobiologia e in fenotipi metabolici, rendendo ISYNA1 un nodo utile per studi meccanicistici della segnalazione e dei processi associati alle membrane.
ISYNA1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ISYNA1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ISYNA1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ISYNA1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ISYNA1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.