Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IRF-5 Plasmide Double Nickase (h): sc-400920-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- IRF-5 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il IRF-5 Double Nickase Plasmid (h) e il IRF-5 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira IRF5. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: IRF-5 Antibody (C-6): sc-390364
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
IRF-5 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400920-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IRF-5 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400920-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il fattore regolatore dell’interferone 5 (IRF5) è un fattore di trascrizione che integra i segnali dei recettori di riconoscimento di pattern per plasmare le risposte immunitarie innate e adattative. A valle delle vie dei recettori Toll-like e dei recettori di tipo RIG-I, IRF-5 promuove programmi trascrizionali associati alle risposte dell’interferone di tipo I e alla produzione di citochine pro-infiammatorie, influenzando la polarizzazione dei macrofagi e l’attività delle cellule B. L’attività di IRF5 si interseca con la segnalazione NF-κB e MAPK e contribuisce a un controllo dipendente dal contesto dell’apoptosi e delle decisioni sullo stato cellulare. Variazioni genetiche e di espressione di IRF5 sono state associate a disregolazione immunitaria e a una maggiore suscettibilità a fenotipi di malattie autoimmuni e infiammatorie, rendendolo un nodo chiave per studi meccanicistici in immunologia.
IRF-5 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus IRF5 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di IRF5. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di IRF5. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con IRF5 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.