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IRF-5双切口酶质粒(h) | sc-400920-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IRF-5双切口酶质粒(h2) | sc-400920-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
干扰素调节因子5(IRF5)是一种转录因子,可整合模式识别受体信号传导,从而塑造先天性与适应性免疫应答。作为Toll样受体和RIG-I样受体通路的下游分子,IRF-5促进与I型干扰素应答和促炎性细胞因子产生相关的转录程序,进而影响巨噬细胞极化和B细胞活性。IRF5的活性与NF-κB和MAPK信号通路发生交叉,并参与对凋亡及细胞状态决定的情境依赖性调控。IRF5的遗传与表达变异已被证实与免疫失调以及对自身免疫和炎症性疾病表型的易感性相关,使其成为免疫学机制研究中的关键节点。
IRF-5 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 IRF5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对IRF5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏IRF5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了IRF5基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。