Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IQGAP1 Plasmide Double Nickase (m): sc-424375-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- IQGAP1 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il IQGAP1 Double Nickase Plasmid (m) e il IQGAP1 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Iqgap1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: IQGAP1 Antibody (C-9): sc-376021
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
IQGAP1 Plasmide Double Nickase (m) | sc-424375-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IQGAP1 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-424375-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Mouse Iqgap1 codifica IQGAP1, una proteina scaffold multidominio che coordina il rimodellamento del citoscheletro di actina con il traffico di membrana e la trasduzione del segnale. IQGAP1 lega piccole GTPasi come CDC42 e RAC1 e interagisce con β-catenina, calmodulina e componenti della via MAPK per regolare polarità cellulare, adesione, migrazione e citochinesi. Attraverso queste interazioni contribuisce a integrare i circuiti che controllano la stabilità delle giunzioni e le riorganizzazioni dinamiche del citoscheletro, processi spesso studiati nella morfogenesi tissutale e nella motilità delle cellule immunitarie. La deregolazione della segnalazione associata a IQGAP1 e l’alterazione dei programmi di adesione cellula–cellula sono comunemente investigate in modelli di infiammazione, fibrosi e fenotipi correlati al cancro, a supporto della sua rilevanza nella ricerca sui meccanismi di malattia.
IQGAP1 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Iqgap1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Iqgap1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Iqgap1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Iqgap1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.