Integrin α3/ITGA3/CD49c Plasmide Double Nickase (m): sc-421161-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Integrin α3/ITGA3/CD49c Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Integrin α3/ITGA3/CD49c Double Nickase Plasmid (m) e il Integrin α3/ITGA3/CD49c Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Itga3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Integrin α3/ITGA3/CD49c Antibody (A-3): sc-374242
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Integrin α3/ITGA3/CD49c Plasmide Double Nickase (m) | sc-421161-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Integrin α3/ITGA3/CD49c Plasmide Double Nickase (m2) | sc-421161-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Itga3 codifica l’integrina α3 (CD49c), che eterodimerizza con l’integrina β1 formando un recettore legante la laminina che media l’adesione cellula–matrice extracellulare e l’organizzazione della membrana basale. La segnalazione dipendente da ITGA3 regola la dinamica delle adesioni focali, il rimodellamento del citoscheletro e la polarità delle cellule epiteliali attraverso vie che includono FAK/Src, PI3K–AKT e MAPK, influenzando migrazione, proliferazione e sopravvivenza. Nei tessuti murini, l’integrina α3 contribuisce all’integrità dell’epitelio in organi come pelle, polmone e rene, e la sua disregolazione è spesso studiata in contesti di adesione alterata, infiammazione e fenotipi invasivi rilevanti per la biologia del cancro e il rimodellamento tissutale.
Integrin α3/ITGA3/CD49c Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Itga3 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Itga3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Itga3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Itga3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.