IL-6Rα Plasmide Double Nickase (h): sc-400582-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- IL-6Rα Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il IL-6Rα Double Nickase Plasmid (h) e il IL-6Rα Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira IL6R. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: IL-6Rα Antibody (H-7): sc-373708
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
IL-6Rα Plasmide Double Nickase (h) | sc-400582-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-6Rα Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400582-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il recettore alfa dell’interleuchina-6 (IL-6Rα), codificato da IL6R, è la subunità di legame del ligando del complesso recettoriale dell’IL-6 che avvia la segnalazione in seguito al legame con l’IL-6 e all’associazione con il co-recettore GP130. Questo asse recettoriale attiva JAK/STAT3 oltre alle vie MAPK e PI3K/AKT, coordinando le risposte di fase acuta, la differenziazione dei leucociti e programmi genici infiammatori più ampi. IL6R contribuisce anche alla trans-segnalazione dell’IL-6 tramite la forma solubile di IL-6R, estendendo la responsività a cellule che esprimono principalmente GP130. Una segnalazione IL6R deregolata è stata implicata nell’infiammazione cronica e in patologie immuno-mediate ed è spesso studiata in contesti quali la biologia delle malattie autoimmuni, l’infiammazione associata al cancro e i processi infiammatori cardiovascolari.
IL-6Rα Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus IL6R nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di IL6R. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di IL6R. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con IL6R interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.