Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IL-6Rα Double Nickaseプラスミド (h): sc-400582-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- IL-6Rα Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- IL-6Rαダブルニカースプラスミド（h）およびIL-6Rαダブルニカースプラスミド（h2）は、IL6Rを標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: IL-6Rα 抗体 (H-7): sc-373708
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
IL-6Rα Double Nickaseプラスミド (h) | sc-400582-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-6Rα Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-400582-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
インターロイキン6受容体α（IL-6Rα）はIL6R遺伝子にコードされ、IL-6受容体複合体においてリガンド結合を担うサブユニットであり、IL-6が結合して共受容体GP130と会合することでシグナル伝達を開始します。この受容体軸はJAK/STAT3に加えてMAPK経路およびPI3K/AKT経路も活性化し、急性期反応、白血球の分化、ならびにより広範な炎症性遺伝子プログラムを統合的に制御します。IL6Rは可溶性IL-6Rを介したIL-6トランスシグナル伝達にも関与し、主としてGP130を発現する細胞へと応答性を拡張します。IL6Rシグナルの制御異常は慢性炎症や免疫介在性病態との関連が示されており、自己免疫疾患の病態生物学、がん関連炎症、心血管系の炎症プロセスなどの文脈で頻繁に研究されています。
IL-6Rα ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における IL6R 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、IL6R内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、IL6Rの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、IL6Rが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。