Il-28a Double Nickaseプラスミド (m2): sc-437298-NIC-2
- 対象生物種: mouse
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- Il-28a CRISPR/Cas9 KOPlasmid Double Nickaseプラスミド (m2)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- Il-28a CRISPR/Cas9 KOPlasmidダブルニカースプラスミド（m2）およびIl-28a CRISPR/Cas9 KOPlasmidダブルニカースプラスミド（m22）は、Ifnl2を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
Il-28a Double Nickaseプラスミド (m2) | sc-437298-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
マウスのGbp2bは、インターフェロンによって駆動される細胞内在性免疫に関与するグアニル酸結合タンパク質ファミリーの一員をコードし、JAK–STAT経路およびインターフェロン刺激遺伝子（ISG）プログラムの下流において、抗微生物的な増殖制限や自然免疫シグナル伝達の協調に寄与する。Il-28aタンパク質（IFN-λ2としても知られる）はIII型インターフェロンであり、IFNLR1/IL10RB受容体複合体を介してシグナル伝達し、STAT1/STAT2–IRF9（ISGF3）による転写応答を活性化することで、上皮・粘膜における抗ウイルス防御を形成し、炎症性サイトカインネットワークを調節する。これらの経路の破綻は、ウイルス感受性、バリア免疫、ならびに気道および消化管の炎症を含む慢性炎症性表現型の研究において重要である。マウスモデルでGbp2bまたはIl-28aを遺伝子編集することにより、感染チャレンジ、トランスクリプトミクス、免疫細胞プロファイリングを用いて、インターフェロン間クロストーク、病原体—宿主相互作用、ならびに下流の転写プログラムの機序解明が可能となる。
Il-28a CRISPR/Cas9 KOPlasmid ダブルニカースプラスミド（m2）は、mouse 細胞株における Ifnl2 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、Ifnl2内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、Ifnl2の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、Ifnl2が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。