IL-15Rα Plasmide Double Nickase (h): sc-416909-NIC

IL15RA umano codifica la catena alfa del recettore dell’interleuchina-15 (IL-15Rα), un componente di legame ad alta affinità che cattura l’IL-15 e la presenta in trans a cellule che esprimono IL-2/IL-15Rβ e la catena γ comune. Questo complesso recettoriale attiva una segnalazione dipendente da JAK1/JAK3 con coinvolgimento a valle di STAT5 e delle vie PI3K–AKT e MAPK, modulando la sopravvivenza, la proliferazione e la differenziazione effettrice dei linfociti. IL-15Rα è centrale per l’omeostasi delle cellule natural killer e delle cellule T CD8+ della memoria e influenza le dinamiche della rete citochinica nei tessuti infiammati. Un’espressione o una segnalazione deregolate di IL15RA sono state associate a patologie immunomediate e a un’alterata sorveglianza immunitaria in contesti infiammatori e oncologici, rendendolo un bersaglio rilevante per studi meccanicistici dell’immunità guidata dalle citochine.

IL-15Rα Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus IL15RA nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di IL15RA. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di IL15RA. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con IL15RA interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.