IL-10Rβ Plasmide Double Nickase (h): sc-404666-NIC

IL10RB codifica la subunità beta del recettore dell’interleuchina-10 (IL-10Rβ), una catena accessoria essenziale condivisa da diversi recettori per citochine di classe II, inclusi quelli per IL-10, IL-22, IL-26 e gli interferoni di tipo III (IFN-λ). Dopo il legame con il ligando, IL-10Rβ si associa alla corrispondente subunità alfa specifica per quel ligando, supportando l’attivazione di JAK1/TYK2 e la segnalazione STAT a valle, plasmando programmi trascrizionali che regolano l’infiammazione, la funzione della barriera epiteliale e le risposte antivirali. Questa subunità recettoriale è quindi centrale per l’omeostasi immunitaria guidata dalle citochine sulle superfici mucosali e nei compartimenti mieloidi e linfoidi. Le alterazioni della segnalazione dipendente da IL10RB sono spesso studiate nel contesto di risposte citochiniche disregolate rilevanti per la biologia delle infezioni, le patologie infiammatorie e i meccanismi immunomediati.

IL-10Rβ Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus IL10RB nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di IL10RB. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di IL10RB. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con IL10RB interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.