Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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HSP 56 Plasmide Double Nickase (h): sc-403455-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- HSP 56 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il HSP 56 Double Nickase Plasmid (h) e il HSP 56 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira FKBP4. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: HSP 56 Antibody (329.1): sc-100758
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
HSP 56 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403455-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HSP 56 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403455-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FKBP4 codifica per l’immunofillina FKBP52 (HSP 56), un co-chaperone con dominio TPR che si associa ai complessi HSP90 per regolare il ripiegamento, la stabilità e il traffico delle proteine client. È nota soprattutto per la modulazione della maturazione dei recettori degli ormoni steroidei e della loro traslocazione nel nucleo, collegando l’attività chaperonica alle vie di segnalazione dei recettori degli androgeni, dei glucocorticoidi e del progesterone. FKBP4 interagisce anche con la macchina di trasporto del citoscheletro e può influenzare le risposte cellulari allo stress attraverso reti di proteostasi. Una funzione deregolata del co-chaperone FKBP4/HSP90 è stata implicata nelle alterazioni della segnalazione ormonale e dell’omeostasi proteica osservate in contesti di ricerca sulla biologia del cancro e sulla neurodegenerazione.
HSP 56 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus FKBP4 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di FKBP4. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di FKBP4. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con FKBP4 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.