HSBP1 Plasmide Double Nickase (h): sc-416835-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- HSBP1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il HSBP1 Double Nickase Plasmid (h) e il HSBP1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HSBP1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: HSBP1 Antibody (2C3): sc-517153
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
HSBP1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-416835-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HSBP1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-416835-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HSBP1 umano (heat shock factor binding protein 1) è una piccola proteina regolatoria a coiled-coil che si lega al fattore di shock termico 1 (HSF1) e modula la risposta allo shock termico attenuando la trimerizzazione e l’attività trascrizionale di HSF1. Attraverso questo controllo a feedback, HSBP1 contribuisce a plasmare i programmi di proteostasi che coinvolgono chaperoni molecolari ed espressione genica indotta dallo stress, influenzando la tolleranza cellulare allo stress termico, ossidativo e proteotossico. La regolazione mediata da HSBP1 si interseca con vie che governano il controllo qualità delle proteine, la progressione del ciclo cellulare e la segnalazione adattativa allo stress. Una segnalazione dello shock termico e reti di chaperoni deregolate sono spesso implicate nella biologia del cancro, nelle neurodegenerazioni e in altri disturbi caratterizzati da misfolding proteico, rendendo HSBP1 un nodo utile per studi meccanicistici dei circuiti di risposta allo stress.
HSBP1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HSBP1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HSBP1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HSBP1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HSBP1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.