HoxB2 Plasmide Double Nickase (h): sc-404533-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- HoxB2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il HoxB2 Double Nickase Plasmid (h) e il HoxB2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HOXB2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
HoxB2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404533-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HoxB2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404533-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HOXB2 codifica il fattore di trascrizione homeobox HoxB2, un regolatore che si lega al DNA in modo sequenza-specifico e che definisce l’asse antero-posteriore durante l’embriogenesi, sostenendo programmi di segmentazione e differenziamento nel rombencefalo in sviluppo e nei tessuti derivati dalla cresta neurale. Nell’ambito delle reti regolatorie dei geni HOX, HoxB2 coordina programmi trascrizionali che controllano la specificazione di linea, il mantenimento dell’identità cellulare e vie di sviluppo sensibili ai morfogeni, inclusa la patterning dipendente dall’acido retinoico. Un’espressione deregolata di HOXB2 è stata riportata in molteplici tipi di tumore ed è oggetto di studio per i suoi possibili ruoli in stati di differenziamento aberranti, comportamento invasivo e rimodellamento trascrizionale in modelli di cancro. Nei sistemi cellulari umani, la perturbazione di HOXB2 è comunemente utilizzata per interrogare i circuiti regolatori genici dello sviluppo e cambiamenti del destino cellulare rilevanti per la malattia.
HoxB2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HOXB2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HOXB2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HOXB2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HOXB2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.