GHRH Plasmide Double Nickase (h): sc-404753-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- GHRH Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il GHRH Double Nickase Plasmid (h) e il GHRH Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira GHRH. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
GHRH Plasmide Double Nickase (h) | sc-404753-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GHRH Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404753-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **GHRH** codifica l’ormone di rilascio dell’ormone della crescita (growth hormone–releasing hormone), un neuropeptide ipotalamico che si lega al recettore **GHRHR** sui somatotrofi ipofisari per stimolare la sintesi e la secrezione dell’ormone della crescita (GH). Attraverso la segnalazione **cAMP/PKA**, il GHRH regola il rilascio pulsatile di GH e influenza l’attività a valle dell’asse **IGF-1**, collegando il controllo neuroendocrino alla crescita sistemica, al metabolismo e all’omeostasi tissutale. La segnalazione del GHRH interseca vie che governano il bilancio energetico, il sonno e la neurobiologia circadiana, nonché la regolazione endocrina responsiva allo stress. La disregolazione dell’asse **GHRH–GHRHR–GH** è rilevante per i disturbi della crescita e del fenotipo metabolico e offre un punto di accesso meccanicistico per studiare i contributi neuroendocrini alla funzione ipofisaria e alla fisiologia guidata dagli ormoni.
GHRH Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus GHRH nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di GHRH. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di GHRH. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con GHRH interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.