GABAA Rβ2 Plasmide Double Nickase (h): sc-405041-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- GABAA Rβ2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il GABAA Rβ2 Double Nickase Plasmid (h) e il GABAA Rβ2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira GABRB2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
GABAA Rβ2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-405041-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GABAA Rβ2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405041-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GABRB2 codifica la subunità β2 del recettore umano dell’acido γ-aminobutirrico di tipo A (GABA\_A Rβ2), un componente fondamentale dei canali del cloruro attivati da ligando che mediano la neurotrasmissione inibitoria rapida nel sistema nervoso centrale. Assemblandosi con altre subunità del recettore GABA\_A, GABA\_A Rβ2 influenza il traffico del recettore, il clustering sinaptico e le proprietà di gating del canale che determinano l’eccitabilità neuronale e le oscillazioni di rete. La funzione di GABRB2 è integrata con l’organizzazione delle sinapsi inibitorie, la segnalazione postsinaptica e la plasticità dipendente dall’attività, collegandola a vie che controllano l’equilibrio eccitazione–inibizione. Alterazioni genetiche o funzionali di GABRB2 sono state associate a fenotipi neuroevolutivi e neuropsichiatrici, inclusa la suscettibilità alle crisi, rendendolo rilevante per studi meccanicistici della disfunzione dei circuiti inibitori.
GABAA Rβ2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus GABRB2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di GABRB2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di GABRB2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con GABRB2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.