Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ErbB2/HER2 Plasmide Double Nickase (m): sc-420218-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ErbB2/HER2 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ErbB2/HER2 Double Nickase Plasmid (m) e il ErbB2/HER2 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Erbb2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: ErbB2/HER2 Antibody (3B5): sc-33684
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ErbB2/HER2 Plasmide Double Nickase (m) | sc-420218-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ErbB2/HER2 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-420218-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Erbb2 codifica per la tirosin-chinasi recettoriale ErbB2/HER2, un membro della famiglia EGFR/ErbB che funge da partner preferenziale di eterodimerizzazione per amplificare la segnalazione indotta dai ligandi. Una volta attivato, ErbB2 attiva le cascate PI3K–AKT–mTOR e RAS–RAF–MEK–ERK per regolare proliferazione, sopravvivenza, metabolismo e differenziamento, con ulteriori ruoli nella polarità epiteliale e nello sviluppo della ghiandola mammaria. La deregolazione della segnalazione di ErbB2 è associata alla trasformazione oncogenica e ad alterazioni del controllo del ciclo cellulare, rendendo Erbb2 un nodo ampiamente utilizzato per studiare il cross-talk tra recettori e l’integrazione dei segnali. I modelli murini di Erbb2 sono inoltre impiegati per indagare fenotipi dipendenti dalla via di segnalazione in contesti di sviluppo e rilevanti per la malattia.
ErbB2/HER2 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Erbb2 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Erbb2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Erbb2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Erbb2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.