DSC3 Plasmide Double Nickase (h): sc-404696-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- DSC3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il DSC3 Double Nickase Plasmid (h) e il DSC3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira DSC3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: DSC3 Antibody (93-71): sc-81806
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
DSC3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404696-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DSC3 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404696-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **DSC3** codifica la desmocollina-3, una caderina calcio-dipendente che costituisce il nucleo adesivo dei desmosomi negli epiteli stratificati. DSC3 coopera con le desmogleine e con le proteine citoplasmatiche della placca per collegare i filamenti intermedi e mantenere l’integrità tissutale, contribuendo a vie che regolano l’assemblaggio delle giunzioni cellula–cellula, la differenziazione epiteliale e le risposte allo stress meccanico. Un’alterata espressione di DSC3 o la disfunzione desmosomiale è stata associata a una compromissione della funzione di barriera, a cambiamenti nella coesione e nella motilità cellulare e a fenotipi patologici epiteliali, inclusa la progressione correlata al cancro e disturbi infiammatori della cute. Poiché i desmosomi si interfacciano con il rimodellamento del citoscheletro e con reti di segnalazione, DSC3 è spesso studiato nella biologia delle giunzioni, nell’omeostasi epiteliale e nella regolazione dell’espressione genica dipendente dall’adesione.
DSC3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus DSC3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di DSC3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di DSC3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con DSC3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.