DOM3Z Plasmide Double Nickase (h): sc-409469-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- DOM3Z Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il DOM3Z Double Nickase Plasmid (h) e il DOM3Z Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira DXO. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: DOM3Z Antibody (D-9): sc-393167
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
DOM3Z Plasmide Double Nickase (h) | sc-409469-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DOM3Z Plasmide Double Nickase (h2) | sc-409469-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DXO (noto anche come DOM3Z) codifica un enzima di decapping dell’RNA ed esonucleasi di tipo metallo-β-lattamasi, che contribuisce al controllo di qualità dell’RNA nel citoplasma. DOM3Z partecipa a vie di sorveglianza che eliminano RNA con cappuccio anomalo o processati in modo incompleto, modulando così la stabilità degli mRNA e accoppiando il decapping alla degradazione dell’RNA 5′→3′. Influenzando il turnover dei trascritti difettosi e degli intermedi di degradazione, DXO aiuta a mantenere l’integrità del trascrittoma durante le risposte cellulari allo stress e i processi di maturazione dell’RNA. La disregolazione delle reti di degradazione e sorveglianza dell’RNA è spesso associata a programmi di espressione genica alterati osservati nel cancro e in contesti neurodegenerativi e infiammatori, rendendo DXO un bersaglio rilevante per studi meccanicistici.
DOM3Z Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus DXO nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di DXO. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di DXO. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con DXO interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.