Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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DHS Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402858-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DHSO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DHS (h) e o Plasmídeo Double Nickase DHS (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DHPS. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DHS Anticorpo (A-10): sc-365077
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DHS Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402858-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DHS Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402858-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O DHPS humano codifica a desoxihipusina sintase (DHS), uma enzima essencial dependente de NAD que catalisa a primeira etapa da hipusinação ao transferir um grupo aminobutilo da espermidina para o eIF5A, gerando desoxihipusina. Essa modificação pós-traducional é necessária para a atividade do eIF5A e sustenta o alongamento da tradução, o controle da síntese proteica e a progressão do ciclo celular, conectando o metabolismo de poliaminas à proteostase. A função da DHS se cruza com vias que governam o crescimento celular e as respostas ao estresse, e a perturbação do eixo DHPS–eIF5A de hipusinação tem sido associada à proliferação desregulada e a fenótipos de neurodesenvolvimento. Como a hipusinação afeta a tradução seletiva de motivos difíceis de sintetizar, o DHPS é frequentemente estudado no contexto de reprogramação metabólica, estresse proteotóxico e mecanismos que mantêm a homeostase tecidual.
DHS O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DHPS em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DHPS. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DHPS. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DHPS interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.