Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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DDX3X Plasmide Double Nickase (h): sc-401253-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- DDX3X Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il DDX3X Double Nickase Plasmid (h) e il DDX3X Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira DDX3X. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: DDX3 Antibody (2253C5a): sc-81247
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
DDX3X Plasmide Double Nickase (h) | sc-401253-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DDX3X Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401253-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DDX3X codifica un’elicasi dell’RNA di tipo DEAD-box dipendente dall’ATP che coordina molteplici fasi del metabolismo dell’RNA, tra cui lo splicing del pre-mRNA, l’esportazione dell’mRNA, l’inizio della traduzione e la dinamica dei granuli da stress. Rimodellando complessi RNA–proteina, DDX3X integra segnali che influenzano la progressione del ciclo cellulare, il riconoscimento dell’immunità innata e le risposte cellulari allo stress. La deregolazione o la mutazione di DDX3X è stata associata a fenotipi neurosviluppo e osservata ripetutamente in diversi contesti oncologici, a riflesso della sua ampia influenza sull’elaborazione dell’RNA e sulla proteostasi. Queste caratteristiche rendono DDX3X un nodo utile per studiare la funzione delle elicasi dell’RNA, il controllo della traduzione e le vie che collegano la regolazione dell’RNA alla proliferazione e all’adattamento allo stress.
DDX3X Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus DDX3X nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di DDX3X. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di DDX3X. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con DDX3X interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.