Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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creatine kinase-B Plasmide Double Nickase (h): sc-401868-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- creatine kinase-B Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il creatine kinase-B Double Nickase Plasmid (h) e il creatine kinase-B Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CKB. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: creatine kinase-B Antibody (B-9): sc-373686
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
creatine kinase-B Plasmide Double Nickase (h) | sc-401868-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
creatine kinase-B Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401868-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CKB codifica per la creatina chinasi B, una fosfotransferasi citosolica che catalizza il trasferimento reversibile di fosfato tra ATP e creatina, contribuendo a tamponare la carica energetica cellulare. In quanto componente chiave della navetta della fosfocreatina, CKB sostiene la rapida rigenerazione di ATP e collega la domanda energetica alla glicolisi e alla fosforilazione ossidativa, in particolare nei tessuti eccitabili e metabolicamente attivi. L’attività della creatina chinasi B influenza processi quali la dinamica del citoscheletro, il trasporto ionico di membrana e la funzione sinaptica attraverso il controllo locale della disponibilità di ATP. Un’alterata espressione o attività di CKB è stata associata a fenotipi di stress metabolico ed è spesso studiata in ambiti di neurobiologia e di energetica delle cellule tumorali.
creatine kinase-B Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CKB nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CKB. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CKB. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CKB interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.