CPEB2 Double Nickaseプラスミド (h): sc-409367-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- CPEB2 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- CPEB2ダブルニカースプラスミド（h）およびCPEB2ダブルニカースプラスミド（h2）は、CPEB2を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
CPEB2 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-409367-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CPEB2 Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-409367-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CPEB2（cytoplasmic polyadenylation element binding protein 2）はRNA結合タンパク質であり、標的mRNAに存在する細胞質ポリアデニル化エレメントを認識して、poly(A)テール長、翻訳、ならびにmRNAの安定性を制御する。CPEB2は、細胞分化、ストレス応答、状況依存的なタンパク質合成の調節に関わる転写後の遺伝子制御プログラムに寄与する。選択的な翻訳制御を介して、CPEB2は低酸素関連シグナル伝達やRNA顆粒のダイナミクスなど、細胞適応に結びつく経路に影響を及ぼし、その下流で増殖や生存にも作用する。CPEB2活性の破綻やRNA代謝の変化は、異常な翻訳制御が特徴となる腫瘍生物学をはじめ、さまざまな疾患との関連で研究されている。
CPEB2 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における CPEB2 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、CPEB2内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、CPEB2の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、CPEB2が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。