CD37 Plasmide Double Nickase (h): sc-404423-NIC

CD37 è una glicoproteina di superficie appartenente alla famiglia delle tetraspanine, altamente arricchita sui linfociti B maturi e su altri sottotipi di leucociti, dove organizza microdomini di membrana che coordinano la segnalazione dei recettori, l’adesione e il traffico intracellulare. Agendo da scaffold per proteine partner e regolando la segnalazione prossimale al recettore dei linfociti B, CD37 influenza le vie a valle che controllano le soglie di attivazione, la proliferazione e la sopravvivenza. Contribuisce alla formazione della sinapsi immunologica e a processi endocitici che modulano la gestione dell’antigene e la comunicazione intercellulare. Alterazioni dell’espressione o della funzione di CD37 sono state implicate nella disregolazione immunitaria e nella biologia delle neoplasie dei linfociti B, a supporto del suo impiego come marcatore meccanicistico negli studi di segnalazione linfocitaria.

CD37 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CD37 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CD37. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CD37. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CD37 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.