Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CD28 Plasmide Double Nickase (h): sc-401525-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CD28 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CD28 Double Nickase Plasmid (h) e il CD28 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CD28. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CD28 Antibody (CD28.2): sc-19655
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CD28 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401525-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD28 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401525-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CD28 codifica un recettore co-stimolatorio espresso sui linfociti T che coopera con la segnalazione del recettore dei linfociti T per promuovere attivazione, proliferazione, produzione di citochine e sopravvivenza. Il legame di CD28 con CD80/CD86 sulle cellule presentanti l’antigene amplifica la segnalazione PI3K–AKT–mTOR, sostiene l’attivazione delle vie NF-κB e MAPK e aumenta la trascrizione di IL-2, plasmando la differenziazione effettrice e la formazione della memoria. L’attività di CD28 contribuisce a bilanciare tolleranza immunitaria e reattività; alterazioni della segnalazione sono state associate a un’attivazione disregolata dei linfociti T e a patologie immuno-mediate. Poiché CD28 è centrale nel controllo dei checkpoint co-stimolatori, è ampiamente studiato in contesti quali autoimmunità, infiammazione cronica, infezioni e immunologia dei tumori.
CD28 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CD28 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CD28. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CD28. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CD28 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.