CD1C Plasmide Double Nickase (h): sc-403813-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CD1C Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CD1C Double Nickase Plasmid (h) e il CD1C Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CD1C. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CD1C Antibody (B-6): sc-390980
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CD1C Plasmide Double Nickase (h) | sc-403813-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD1C Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403813-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CD1C codifica CD1c, una molecola di presentazione dell’antigene simile alle MHC di classe I che lega ed espone antigeni lipidici e glicolipidici alle cellule T, contribuendo a plasmare il riconoscimento immunitario adattativo. CD1c è espressa in modo marcato su sottopopolazioni di cellule dendritiche e partecipa ai processi di traffico endosomiale e di caricamento dell’antigene che collegano il sensing innato al priming delle cellule T. Attraverso la presentazione dell’antigene ristretta da CD1, CD1c influenza la polarizzazione immunitaria e i programmi citochinici coinvolti nella difesa dell’ospite e nella regolazione dell’infiammazione. Alterazioni nell’abbondanza o nella funzione delle cellule dendritiche che esprimono CD1c sono state associate a disregolazione immunitaria in autoimmunità, infezioni e infiammazione associata ai tumori, rendendo CD1C un nodo utile per studi di immunologia meccanicistica.
CD1C Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CD1C nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CD1C. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CD1C. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CD1C interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.