C1qL1 Plasmide Double Nickase (m): sc-423851-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- C1qL1 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il C1qL1 Double Nickase Plasmid (m) e il C1qL1 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira C1ql1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
C1qL1 Plasmide Double Nickase (m) | sc-423851-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
C1qL1 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-423851-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
C1ql1 codifica C1qL1, una proteina secreta correlata a C1q/TNF, arricchita nel sistema nervoso, che contribuisce alla segnalazione extracellulare e all’organizzazione sinaptica. C1qL1 è stata associata alla regolazione della formazione e del mantenimento delle sinapsi, sostenendo la connettività dei circuiti attraverso interazioni con recettori di superficie neuronali e la segnalazione a valle che modella la trasmissione sinaptica. Questi processi si intrecciano con la biologia “complemento-simile” e dei domini C1q, ampiamente implicata nel rimodellamento sinaptico dipendente dall’attività e nel crosstalk neuroinfiammatorio. Un’espressione o una funzione alterata di C1ql1 è quindi rilevante per studi su fenotipi neuroevolutivi, sull’integrità dei circuiti sensoriali e motori e sui meccanismi di vulnerabilità sinaptica in modelli di malattie neurologiche.
C1qL1 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus C1ql1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di C1ql1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di C1ql1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con C1ql1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.