c-Abl Plasmide Double Nickase (m): sc-418935-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- c-Abl Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il c-Abl Double Nickase Plasmid (m) e il c-Abl Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Abl1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
c-Abl Plasmide Double Nickase (m) | sc-418935-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
c-Abl Plasmide Double Nickase (m2) | sc-418935-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Abl1** codifica la tirosin-chinasi non recettoriale **c-Abl**, un nodo di segnalazione multifunzionale che integra segnali provenienti da fattori di crescita e integrine per regolare il rimodellamento del citoscheletro, l’adesione e la migrazione cellulare, l’endocitosi e il controllo dei checkpoint del ciclo cellulare. L’attività di c-Abl interagisce con la segnalazione del danno al DNA e con le vie di risposta allo stress, modulando reti dipendenti dalla fosforilazione che influenzano apoptosi, differenziamento e programmi trascrizionali. La deregolazione della segnalazione Abl1/c-Abl e l’alterato controllo della chinasi sono ampiamente studiati nella trasformazione oncogenica e nella segnalazione proliferativa aberrante, mentre le perturbazioni della dinamica dell’actina dipendente da c-Abl sono rilevanti per l’invasione e il rimodellamento tissutale. Nei modelli murini, Abl1 è spesso utilizzato per analizzare i circuiti di segnalazione guidati dalle chinasi e per collegare le risposte allo stress genotossico ai cambiamenti del destino cellulare.
c-Abl Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Abl1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Abl1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Abl1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Abl1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.