Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Bax Plasmide Double Nickase (m): sc-419292-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Bax Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Bax Double Nickase Plasmid (m) e il Bax Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Bax. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Bax Antibody (B-9): sc-7480
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Bax Plasmide Double Nickase (m) | sc-419292-NIC | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Bax** codifica **BAX**, un effettore pro-apoptotico della famiglia **BCL-2** che regola la permeabilizzazione della membrana esterna mitocondriale e l’impegno verso l’apoptosi intrinseca. In risposta a stress cellulari, BAX subisce un’attivazione conformazionale e oligomerizza a livello dei mitocondri, favorendo il rilascio del citocromo c, la formazione dell’apoptosoma e l’attivazione della cascata delle caspasi. L’attività di BAX è integrata con la segnalazione di p53, i regolatori BH3-only e vie di sopravvivenza come PI3K–AKT, che modulano la soglia apoptotica. La deregolazione della morte cellulare Bax-dipendente è rilevante negli studi su tumorigenesi, neurodegenerazione e danno tissutale, in cui un’apoptosi mitocondriale alterata influenza il destino cellulare e le risposte allo stress.
Bax Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Bax nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Bax. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Bax. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Bax interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.