Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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BAP1 Plasmide Double Nickase (m): sc-430539-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- BAP1 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il BAP1 Double Nickase Plasmid (m) e il BAP1 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Bap1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: BAP1 Antibody (C-4): sc-28383
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
BAP1 Plasmide Double Nickase (m) | sc-430539-NIC | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino Bap1 codifica la BRCA1 associated protein 1 (BAP1), un enzima nucleare deubiquitinante che regola lo stato della cromatina e i programmi trascrizionali attraverso il complesso PR-DUB, inclusa la rimozione dell’ubiquitina dall’istone H2A. BAP1 interagisce anche con la segnalazione del danno al DNA, il controllo del ciclo cellulare e l’apoptosi, collegando la regolazione proteica dipendente dall’ubiquitina al mantenimento dell’integrità del genoma. Tramite queste funzioni, BAP1 contribuisce a coordinare la regolazione epigenetica con le risposte allo stress nelle cellule in proliferazione. L’alterazione dell’attività di BAP1 è ampiamente studiata nella biologia dei tumori e nelle vie di soppressione tumorale, rendendo Bap1 un bersaglio chiave per studi meccanicistici sul rimodellamento della cromatina e la riparazione del DNA.
BAP1 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Bap1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Bap1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Bap1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Bap1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.