ARRDC3 Plasmide Double Nickase (h): sc-405287-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ARRDC3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ARRDC3 Double Nickase Plasmid (h) e il ARRDC3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ARRDC3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ARRDC3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-405287-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ARRDC3 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405287-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ARRDC3 (arrestin domain containing 3) codifica una proteina adattatrice della famiglia delle α-arrestine che regola il traffico dei recettori di membrana e l’attenuazione del segnale, accoppiando i recettori attivati all’endocitosi dipendente dall’ubiquitina. Attraverso interazioni con ligasi E3 dell’ubiquitina della famiglia NEDD4 e con componenti del macchinario di smistamento endosomiale, ARRDC3 contribuisce al controllo del turnover recettoriale e degli output di segnalazione a valle, inclusi percorsi legati alla regolazione dei GPCR e dei recettori per i fattori di crescita. La sua attività è stata associata a processi cellulari quali migrazione, omeostasi metabolica e risposte allo stress, che dipendono da una modulazione precisa dell’abbondanza dei recettori di superficie. Alterazioni dell’espressione o della funzione di ARRDC3 sono state riportate in contesti rilevanti per l’invasività delle cellule tumorali e per fenotipi metabolici, rendendola un nodo utile per studi meccanicistici di segnalazione e traffico intracellulare.
ARRDC3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ARRDC3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ARRDC3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ARRDC3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ARRDC3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.