APLNR Plasmide Double Nickase (h): sc-402374-NIC

APLNR codifica per il recettore dell’apelina, un recettore accoppiato a proteine G di classe A che lega i peptidi apelina ed Elabela/Toddler per regolare lo sviluppo cardiovascolare, l’angiogenesi e l’omeostasi dei fluidi tissutali. In seguito al legame con il ligando, APLNR si accoppia principalmente a Gαi e a una segnalazione dipendente da β-arrestina, modulando vie quali PI3K–AKT, MAPK/ERK e la segnalazione dell’ossido nitrico, che influenzano la funzione endoteliale e la migrazione cellulare. Una segnalazione di APLNR deregolata è stata implicata nella biologia cardiometabolica e vascolare, inclusi il rimodellamento associato allo scompenso cardiaco, l’ipertensione polmonare e l’angiogenesi associata ai tumori, rendendolo un nodo utile per analizzare la segnalazione del microambiente. Nei modelli cellulari, la perturbazione di APLNR consente studi meccanicistici sulle dinamiche ligando-recettore, sulla desensibilizzazione/internalizzazione del recettore e sulle risposte trascrizionali a valle.

APLNR Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus APLNR nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di APLNR. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di APLNR. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con APLNR interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.