ABHD12 Plasmide Double Nickase (h): sc-405543-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ABHD12 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ABHD12 Double Nickase Plasmid (h) e il ABHD12 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ABHD12. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ABHD12 Plasmide Double Nickase (h) | sc-405543-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ABHD12 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405543-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ABHD12 (abhydrolase domain containing 12) codifica un’idrolasi serinica associata alla membrana che regola la segnalazione lipidica idrolizzando lisofosfolipidi bioattivi e metaboliti correlati dei glicerofosfolipidi. Attraverso il controllo della liso-fosfatidilserina e delle reti lipidiche a valle collegate al sistema endocannabinoide e alla neuroimmunità, ABHD12 influenza la funzione della microglia, il tono infiammatorio e l’omeostasi delle membrane nel sistema nervoso centrale. Alterazioni dell’attività di ABHD12 modificano la composizione lipidica e le vie di segnalazione che intersecano le risposte allo stress ossidativo e il mantenimento sinaptico. Varianti loss-of-function di ABHD12 nell’uomo sono associate al disturbo neurodegenerativo PHARC, a conferma della sua rilevanza per studi sul metabolismo lipidico e sulla neuroinfiammazione.
ABHD12 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ABHD12 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ABHD12. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ABHD12. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ABHD12 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.