ZRSR1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-423570

Panoramica

Zrsr1 codifica ZRSR1, un fattore associato allo spliceosoma implicato nel riconoscimento e nella processazione degli introni di tipo U12 durante lo splicing del pre‑mRNA. Influenzando l’attività dello spliceosoma minore, ZRSR1 può incidere sulla maturazione dei trascritti, sull’equilibrio tra isoforme e sui programmi di espressione genica a valle legati al controllo del ciclo cellulare e alla differenziazione. Nel topo, Zrsr1 è inoltre rilevante nel contesto dell’imprinting genomico e degli effetti legati all’origine parentale, offrendo un quadro per studiare la regolazione allele‑specifica del processamento dell’RNA. La deregolazione dello splicing degli introni minori è stata collegata ad anomalie dello sviluppo e a disfunzioni ematopoietiche in molteplici sistemi modello, rendendo Zrsr1 pertinente per studi meccanicistici sulla biologia delle patologie associate allo splicing.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO ZRSR1 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Zrsr1 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Zrsr1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Zrsr1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina ZRSR1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Zrsr1 per lo studio della segnalazione di ZRSR1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Zrsr1 critici per la funzione di ZRSR1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Zrsr1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal ZRSR1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal ZRSR1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Zrsr1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal ZRSR1 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR ZRSR1 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Zrsr1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Zrsr1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.