ZNRF2 Plasmide Double Nickase (h): sc-408350-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ZNRF2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ZNRF2 Double Nickase Plasmid (h) e il ZNRF2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ZNRF2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ZNRF2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-408350-NIC | 20 µg | $410.00 |
ZNRF2 umano codifica una ligasi E3 dell’ubiquitina di tipo RING che contribuisce al controllo ubiquitina-dipendente del turnover proteico e degli output di segnalazione. Modulando l’ubiquitinazione dei substrati, ZNRF2 può influenzare processi cellulari quali la segnalazione mediata da recettori e chinasi, la proteostasi e l’adattamento delle vie di segnalazione a stimoli ambientali. Un’attività di ligasi dell’ubiquitina deregolata è frequentemente associata ad alterazioni del controllo della crescita e delle risposte allo stress, rendendo ZNRF2 un nodo utile per analizzare i meccanismi che collegano l’ubiquitinazione al rimaneggiamento delle vie di segnalazione. La ricerca su ZNRF2 supporta studi sulla fedeltà della segnalazione, sulla stabilità proteica e su circuiti regolatori dipendenti dal contesto, rilevanti per fenotipi cellulari associati a malattie.
ZNRF2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ZNRF2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ZNRF2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ZNRF2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ZNRF2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.