ZNF703 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406411

Panoramica

ZNF703 (proteina a dita di zinco 703) è un regolatore trascrizionale nucleare implicato nel controllo di programmi di espressione genica legati alla differenziazione epiteliale, alla progressione del ciclo cellulare e alla specificazione di linea cellulare. In quanto membro della famiglia NET/NLZ, ZNF703 può operare all’interno di complessi di repressione trascrizionale e di complessi associati alla cromatina per modulare la segnalazione dello sviluppo e le reti trascrizionali a valle. Un’espressione deregolata di ZNF703 è stata associata a fenotipi proliferativi e migratori alterati ed è spesso studiata nel contesto della biologia dell’amplicone 8p12 nella ricerca sul carcinoma mammario. Queste caratteristiche rendono ZNF703 un bersaglio utile per indagare i circuiti regolatori guidati da fattori di trascrizione, gli stati trascrizionali oncogenici e le dipendenze di via in modelli cellulari umani.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO ZNF703 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene ZNF703 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del ZNF703 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto ZNF703 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina ZNF703.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di ZNF703 per lo studio della segnalazione di ZNF703, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni ZNF703 critici per la funzione di ZNF703
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di ZNF703 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal ZNF703 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal ZNF703 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus ZNF703. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal ZNF703 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR ZNF703 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia ZNF703 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio ZNF703 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.