ZNF526 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-431684

Visão geral

Zfp526 codifica a proteína de dedo de zinco murina ZNF526, um suposto fator nuclear de ligação ao DNA implicado na regulação transcricional por meio de interações mediadas por dedos de zinco do tipo C2H2 com elementos regulatórios. Como ocorre com muitas proteínas de dedo de zinco associadas a KRAB, espera-se que a ZNF526 participe do silenciamento gênico dependente de cromatina e da modulação de programas de transcrição específicos de linhagem que influenciam o estado celular e a diferenciação. A expressão alterada ou a desregulação de fatores de transcrição do tipo dedo de zinco pode perturbar redes de controle epigenético e vias de sinalização a jusante, oferecendo uma base para estudar mecanismos de regulação gênica relevantes para fenótipos do desenvolvimento e desequilíbrios transcricionais associados a doenças. A investigação funcional de Zfp526 dá suporte a estudos sobre como as interfaces entre fatores de transcrição e cromatina moldam a expressão gênica e a homeostase celular em sistemas de modelos murinos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ZNF526 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Zfp526 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Zfp526, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Zfp526 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ZNF526.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Zfp526 para a investigação da sinalização de ZNF526, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Zfp526 críticos para a função ZNF526
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Zfp526 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo ZNF526 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ZNF526 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Zfp526. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo ZNF526 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ZNF526 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Zfp526 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Zfp526 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.