Plásmido Doble Nickase (h) ZNF35: sc-411079-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ZNF35 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ZNF35 (h) y el plásmido de doble nickasa ZNF35 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ZNF35. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ZNF35 Anticuerpo (C-11): sc-376972
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ZNF35 | sc-411079-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ZNF35 | sc-411079-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ZNF35 codifica una proteína de dedos de zinc C2H2 con dominio KRAB, implicada en la unión al ADN de manera específica de secuencia y en la represión transcripcional mediante el reclutamiento de complejos correpresores como KAP1/TRIM28, lo que promueve la formación de heterocromatina y el silenciamiento epigenético. Como parte de redes más amplias de regulación génica mediadas por dedos de zinc, ZNF35 está en posición de influir en la organización de la cromatina, el control transcripcional por la ARN polimerasa II y los programas de mantenimiento del estado celular. La expresión alterada o la variación regulatoria en factores KRAB-ZNF se ha asociado con programas transcripcionales desregulados observados en el cáncer y otras enfermedades, lo que convierte a ZNF35 en un nodo útil para estudiar los circuitos transcripcionales y el control epigenético en células humanas. El análisis funcional de ZNF35 puede ayudar a aclarar cómo las proteínas KRAB-ZNF contribuyen a la represión génica específica de linaje y a la estabilidad de los patrones de expresión génica.
ZNF35 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ZNF35 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ZNF35. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ZNF35. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ZNF35 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.