ZNF217 Plasmide Double Nickase (h): sc-408784-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ZNF217 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ZNF217 Double Nickase Plasmid (h) e il ZNF217 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ZNF217. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ZNF217 Plasmide Double Nickase (h) | sc-408784-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ZNF217 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-408784-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ZNF217 codifica un fattore di trascrizione nucleare a dita di zinco C2H2 che agisce come regolatore dell’espressione genica associato alla cromatina, attraverso interazioni con complessi corepressori e di modificazione epigenetica. Influenza programmi trascrizionali legati alla progressione del ciclo cellulare, alla differenziazione e alle risposte al danno al DNA, ed è stato collegato a reti di segnalazione alterate, come PI3K/AKT e TGF-β/SMAD, tramite la regolazione di geni a valle. L’attività disregolata di ZNF217 è spesso studiata nel contesto della riprogrammazione trascrizionale oncogenica, dell’aneuploidia e di fenotipi associati alla metastasi. Di conseguenza, ZNF217 rappresenta un nodo utile per analizzare il controllo dello stato della cromatina sull’espressione genica e il cross-talk tra vie di segnalazione nelle cellule umane.
ZNF217 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ZNF217 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ZNF217. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ZNF217. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ZNF217 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.