Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
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ZFP37 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-416996
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ZFP37 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico ZFP37, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: ZFP37 Antibody (15): sc-293086
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ZFP37 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-416996 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
ZFP37 (zinc finger protein 37) è un fattore di trascrizione umano a dita di zinco C2H2 con dominio KRAB, implicato nel legame al DNA in modo sequenza-specifico e nella repressione della trascrizione. Come parte di complessi regolatori della cromatina associati a KRAB–KAP1/TRIM28, si prevede che ZFP37 influenzi la formazione dell’eterocromatina, il silenziamento epigenetico e il mantenimento di programmi trascrizionali specifici del tipo cellulare. Queste attività collegano ZFP37 a processi nucleari fondamentali quali l’organizzazione della cromatina, la stabilità del genoma e il controllo dell’espressione degli elementi ripetitivi. Un’alterata regolazione delle vie dei fattori KRAB a dita di zinco è stata associata a una differenziazione disregolata e a stati trascrizionali oncogeni, motivando lo studio di ZFP37 in reti di regolazione genica rilevanti per la malattia.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO ZFP37 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene ZFP37 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del ZFP37 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto ZFP37 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina ZFP37.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di ZFP37 per lo studio della segnalazione di ZFP37, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni ZFP37 critici per la funzione di ZFP37
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di ZFP37 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal ZFP37 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal ZFP37 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus ZFP37. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal ZFP37 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR ZFP37 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia ZFP37 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio ZFP37 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.