Partículas Lentivirales de Activación (h) YB-1: sc-401385-LAC

YBX1 codifica la proteína 1 de unión a la caja Y (YB-1), un regulador de unión a ARN/ADN que coordina la transcripción, el empalme (splicing) del ARNm, su estabilización y su traducción en respuesta al estrés celular. YB-1 participa en vías vinculadas al control del ciclo celular, las respuestas al daño del ADN y la remodelación de complejos ribonucleoproteicos, influyendo en procesos como la proliferación, la apoptosis y la transición epitelio-mesenquimal. La actividad desregulada de YBX1/YB-1 se ha asociado con redes de señalización oncogénica, fenotipos de resistencia a fármacos y programas inflamatorios y fibróticos, lo que la convierte en un nodo ampliamente estudiado en biología tumoral y en mecanismos de adaptación al estrés. Como proteína multifuncional de unión a ácidos nucleicos, YB-1 se investiga con frecuencia por sus funciones en la regulación génica postranscripcional y la interacción (crosstalk) entre factores de transcripción.

Las partículas de activación lentiviral YB-1 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de YBX1 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral YB-1 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción YBX1, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de YB-1. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo YBX1 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.