XRCC1 Plasmide Double Nickase (m): sc-423738-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- XRCC1 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il XRCC1 Double Nickase Plasmid (m) e il XRCC1 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Xrcc1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
XRCC1 Plasmide Double Nickase (m) | sc-423738-NIC | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Xrcc1** codifica **XRCC1**, una proteina “scaffold” che coordina la riparazione per escissione di basi (BER) e la riparazione delle rotture a singolo filamento assemblando, nei siti di danno, fattori quali la DNA ligasi III, POLβ e PARP1. XRCC1 sostiene il mantenimento del genoma durante replicazione e trascrizione promuovendo l’elaborazione e la sigillatura tempestive delle interruzioni del filamento di DNA, limitando così aberrazioni cromosomiche e stress replicativo. L’alterazione della riparazione dipendente da XRCC1 aumenta la segnalazione del danno al DNA e può sensibilizzare le cellule a lesioni ossidative endogene e a insulti genotossici, collegando questa via a meccanismi di mutagenesi e instabilità genomica rilevanti per fenotipi associati a malattia in diversi tessuti.
XRCC1 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Xrcc1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Xrcc1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Xrcc1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Xrcc1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.