WDR68 Plasmide Double Nickase (h): sc-409221-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- WDR68 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il WDR68 Double Nickase Plasmid (h) e il WDR68 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira DCAF7. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
WDR68 Plasmide Double Nickase (h) | sc-409221-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
WDR68 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-409221-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DCAF7 (WDR68) codifica una proteina scaffolding conservata a ripetizioni WD che supporta l’assemblaggio di complessi di segnalazione e coordina la regolazione della trascrizione e dei programmi di sviluppo mediata da chinasi. WDR68 è stata implicata nella segnalazione correlata alle MAPK e nella modulazione di eventi nucleari tramite interazioni con chinasi proteiche e regolatori trascrizionali, collegando segnali extracellulari a cambiamenti nell’espressione genica. Influenzando la stabilità dei complessi proteici e la localizzazione subcellulare, WDR68 contribuisce al controllo della proliferazione e della differenziazione cellulare. La disregolazione delle reti associate a WDR68 è stata esaminata nel contesto della segnalazione legata al cancro e di altre patologie in cui sono coinvolte vie chinasi e trascrizionali aberranti.
WDR68 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus DCAF7 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di DCAF7. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di DCAF7. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con DCAF7 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.