Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
WDR59 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-405648
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- WDR59 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在WDR59基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
WDR59 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-405648 | 20 µg | $397.00 |
概述
WDR59（WD重复结构域蛋白59）是一种含WD40重复序列的支架蛋白，作为GATOR2复合体的核心组分发挥作用；GATOR2是mTORC1信号通路的重要上游调控因子。通过GATOR2，WDR59参与氨基酸感知通路，调控溶酶体上mTORC1的激活，从而影响蛋白质合成、对营养状态有响应的生长程序以及自噬。WDR59依赖的信号传导一旦受到扰动，会重塑细胞代谢与应激反应——这些过程在肿瘤生物学以及其他与mTOR活性失衡相关的疾病研究中经常被重点探究。因此，WDR59常被用于研究其在整合营养可用性与细胞生长及稳态维持之间的作用。
WDR59 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中WDR59基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对WDR59基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏WDR59开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使WDR59蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建WDR59缺失的细胞模型，用于WDR59信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 WDR59 功能至关重要的 WDR59 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 WDR59 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 WDR59 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 WDR59 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 WDR59 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 WDR59 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 WDR59 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由WDR59同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定WDR59靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。