WDR24 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407847

Descripción general

WDR24 codifica una proteína que contiene repeticiones WD y que actúa como un componente central del complejo GATOR2, un regulador clave del control de la señalización de mTORC1 mediado por la detección de aminoácidos. A través de la modulación de la actividad de GATOR1, WDR24 ayuda a coordinar la disponibilidad de nutrientes con la activación lisosomal de mTORC1, lo que repercute en la autofagia, la síntesis de proteínas y los programas de crecimiento celular. La alteración de este eje puede modificar la homeostasis metabólica y las respuestas al estrés, vinculando las vías asociadas a WDR24 con mecanismos estudiados con frecuencia en el metabolismo del cáncer, la neurobiología y otros contextos en los que se ha implicado la desregulación de mTORC1. Por lo tanto, WDR24 es relevante para desentrañar los circuitos de señalización de nutrientes y sus efectos transcripcionales y translacionales aguas abajo.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO WDR24 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen WDR24 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del WDR24 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de WDR24 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína WDR24.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en WDR24 para la investigación de la señalización de WDR24, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de WDR24 críticos para la función de WDR24
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de WDR24 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido WDR24 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido WDR24 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus WDR24. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR WDR24 (h) y el plásmido HDR WDR24 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología WDR24 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana WDR24 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.