Vasohibin-2 Lentiviral Activation Particles (h): sc-407838-LAC

VASH2 kodiert Vasohibin-2, einen sezernierten und zellassoziierten Regulator der Angiogenese, der das Sprossungswachstum von Endothelzellen, die Gefäßreifung und den Umbau des Mikromilieus moduliert. Es ist an Signalwegen beteiligt, die die Dynamik der extrazellulären Matrix, Zellmigration und parakrine Signalübertragung zwischen stromalen und vaskulären Kompartimenten steuern, mit nachgeschalteten Effekten auf hypoxieadaptive und proangiogene Transkriptionsprogramme. Eine veränderte VASH2-Expression wurde in mehreren Krebsarten mit Tumorvaskularisierung und invasiven Phänotypen in Verbindung gebracht und wird außerdem im Kontext entzündungsassoziierten Gewebeumbaus untersucht. Diese Eigenschaften machen VASH2 zu einem nützlichen Knotenpunkt für die Untersuchung angiogener Signalwege, des Endothel–Tumor-Crosstalks und mikromilieugetriebener Krankheitsmechanismen.

Vasohibin-2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente VASH2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Vasohibin-2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der VASH2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Vasohibin-2-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen VASH2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.