Plasmide Double Nickase (h) USP1: sc-406837-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) USP1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide USP1 Double Nickase (h) et le plasmide USP1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant USP1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) USP1 | sc-406837-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) USP1 | sc-406837-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
USP1 humain code une enzyme déubiquitinante qui régule la stabilité du génome en inversant des événements de monoubiquitination au sein de la voie de réparation de l’ADN de l’anémie de Fanconi, notamment la déubiquitination de FANCD2/FANCI. En coordination avec UAF1, USP1 module la signalisation des dommages à l’ADN durant la phase S et influence le choix ainsi que l’efficacité de mécanismes de réparation tels que la recombinaison homologue et la synthèse d’ADN par translésion. L’activité d’USP1 affecte également les réponses au stress réplicatif et le contrôle des points de contrôle du cycle cellulaire en ajustant le turnover des protéines dépendant de l’ubiquitine. Un dysfonctionnement d’USP1 a été associé à une capacité de réparation de l’ADN altérée, à une instabilité chromosomique et à des phénotypes oncogéniques dans de multiples contextes tumoraux, ce qui en fait une cible fréquente des études mécanistiques sur le maintien du génome.
USP1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus USP1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de USP1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de USP1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de USP1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.