Uroguanylin Plasmide Double Nickase (h): sc-404519-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Uroguanylin Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Uroguanylin Double Nickase Plasmid (h) e il Uroguanylin Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira GUCA2B. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Uroguanylin Plasmide Double Nickase (h) | sc-404519-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Uroguanylin Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404519-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GUCA2B codifica l’uroguanylina, un ormone peptidico secreto che attiva il recettore guanilato ciclasi C (GUCY2C) sulle cellule epiteliali intestinali, aumentando i livelli intracellulari di cGMP. Questo asse di segnalazione regola il trasporto di elettroliti e acqua, la funzione di barriera epiteliale e l’omeostasi mucosale tramite vie dipendenti dal cGMP che influenzano l’attività dei canali ionici e delle chinasi a valle. L’uroguanylina è parte integrante della comunicazione lungo l’asse intestino–rene e contribuisce alla natriuresi renale e alla fisiologia correlata alla pressione arteriosa attraverso la segnalazione mediata da cGMP. La disregolazione della segnalazione GUCA2B/GUCY2C–cGMP è stata associata ad alterazioni della secrezione intestinale e dell’integrità della barriera, con implicazioni per condizioni infiammatorie e per la patobiologia epiteliale rilevante per la ricerca sulle patologie colorettali.
Uroguanylin Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus GUCA2B nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di GUCA2B. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di GUCA2B. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con GUCA2B interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.