UFSP2 Plasmide Double Nickase (h): sc-408911-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- UFSP2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il UFSP2 Double Nickase Plasmid (h) e il UFSP2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira UFSP2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: UFSP2 Antibody (G-11): sc-376084
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
UFSP2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-408911-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
UFSP2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-408911-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UFSP2 codifica la peptidasi 2 specifica per UFM1, una proteasi a cisteina che processa UFM1 nella sua forma matura e rimuove le modificazioni UFM1 dalle proteine substrato, regolando così il ciclo di UFMilazione. Questa attività supporta vie di proteostasi collegate all’omeostasi del reticolo endoplasmatico, al controllo qualità associato ai ribosomi e alla segnalazione responsiva allo stress che influenzano la traduzione e la secrezione proteica. Le dinamiche di UFMilazione dipendenti da UFSP2 sono state collegate alla funzione delle cellule ematopoietiche e immunitarie, e un’alterata regolazione di questa via è stata implicata in contesti patologici umani in cui lo stress del RE e il controllo qualità delle proteine risultano compromessi. Come bersaglio di ricerca, UFSP2 viene utilizzato per chiarire come la deUFMilazione controlli il turnover dei substrati e l’adattamento allo stress in diversi tipi cellulari.
UFSP2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus UFSP2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di UFSP2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di UFSP2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con UFSP2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.