UBXD1 Plasmide Double Nickase (h): sc-410159-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- UBXD1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il UBXD1 Double Nickase Plasmid (h) e il UBXD1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira UBXN6. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
UBXD1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-410159-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
UBXD1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-410159-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **UBXN6** codifica **UBXD1**, un adattatore contenente un dominio UBX che collega i substrati poliubiquitinati all’ATPasi AAA+ **VCP/p97**, coordinando il controllo di qualità proteico dipendente dall’ubiquitina. UBXD1 partecipa a processi quali la degradazione associata al reticolo endoplasmatico (ERAD), il traffico endolisosomiale e le vie autofagia–lisosoma, contribuendo a regolare il turnover di proteine mal ripiegate o danneggiate e di complessi associati alla membrana. Attraverso l’accoppiamento agli eventi di estrazione e rimodellamento guidati da VCP/p97, UBXD1 influenza la proteostasi cellulare e le risposte allo stress, spesso alterate nelle patologie neurodegenerative e in altre condizioni associate all’aggregazione proteica. La perturbazione delle vie dipendenti da UBXD1 è quindi rilevante per studi meccanicistici sulla segnalazione dell’ubiquitina, l’omeostasi delle proteine di membrana e le reti di segnalazione infiammatorie o collegate allo stress a valle.
UBXD1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus UBXN6 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di UBXN6. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di UBXN6. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con UBXN6 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.