UBE2U Plasmide Double Nickase (h): sc-409509-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- UBE2U Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il UBE2U Double Nickase Plasmid (h) e il UBE2U Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira UBE2U. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
UBE2U Plasmide Double Nickase (h) | sc-409509-NIC | 20 µg | $410.00 |
UBE2U codifica un enzima E2 coniugante dell’ubiquitina che collabora con le ligasi E1 ed E3 per trasferire l’ubiquitina attivata alle proteine substrato, contribuendo così a modellare la proteostasi e la segnalazione dipendente dall’ubiquitina. Attraverso la regolazione dell’ubiquitinazione, UBE2U può influenzare il turnover proteico, il traffico intracellulare e le vie di controllo qualità che si intersecano con il controllo del ciclo cellulare e le risposte allo stress. Un’attività deregolata della via dell’ubiquitina è ampiamente implicata nella segnalazione oncogenica e nella neurodegenerazione, rendendo UBE2U un nodo utile per analizzare come la coniugazione dell’ubiquitina moduli l’omeostasi cellulare. La ricerca su UBE2U supporta studi meccanicistici sull’architettura delle reti dell’ubiquitina, sulla selezione dei substrati e sul crosstalk tra vie di segnalazione nelle cellule umane.
UBE2U Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus UBE2U nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di UBE2U. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di UBE2U. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con UBE2U interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.