UBE2G2 Plasmide Double Nickase (h): sc-404851-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- UBE2G2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il UBE2G2 Double Nickase Plasmid (h) e il UBE2G2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira UBE2G2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: UBE2G2 Antibody (D-4): sc-393780
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
UBE2G2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404851-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
UBE2G2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404851-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UBE2G2 codifica un enzima E2 coniugante l’ubiquitina che collabora con le ligasi E3 per assemblare catene di ubiquitina e regolare il turnover proteico dipendente dal proteasoma. È un componente chiave della degradazione associata al reticolo endoplasmatico (ERAD), favorendo la rimozione di proteine mal ripiegate o in eccesso e mantenendo la proteostasi in condizioni di stress cellulare. Attraverso il controllo, dipendente dall’ubiquitinazione, della stabilità dei substrati, UBE2G2 influenza vie legate alla risposta alle proteine mal ripiegate (unfolded protein response), alla regolazione del ciclo cellulare e all’intensità della segnalazione. Un’attività deregolata del sistema ubiquitina–proteasoma e dell’ERAD è stata collegata alla biologia dei tumori, alla neurodegenerazione e ad alterazioni della segnalazione immunitaria, rendendo UBE2G2 un nodo utile per studi meccanicistici sul controllo di qualità delle proteine.
UBE2G2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus UBE2G2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di UBE2G2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di UBE2G2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con UBE2G2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.