TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423405

Descripción general

Nkx2-1 codifica TTF-1 (factor de transcripción tiroidea 1), un factor de transcripción que contiene un homeodominio y que coordina la especificación de linaje y los programas de diferenciación en la tiroides, el epitelio pulmonar y regiones del prosencéfalo ventral. NKX2-1 regula redes génicas implicadas en la identidad epitelial, la morfogénesis y la función secretora, incluidas vías que controlan la producción de surfactante y la biosíntesis de hormonas tiroideas. Mediante la unión a potenciadores (enhancers) e interacciones cooperativas con otros reguladores del desarrollo, ayuda a mantener estados transcripcionales específicos de tejido y la accesibilidad de la cromatina. La actividad o expresión desregulada de NKX2-1 se asocia a anomalías del desarrollo y se estudia con frecuencia en el contexto de la biología de enfermedades tiroideas y pulmonares, así como de la tumorogénesis asociada a linaje y las transiciones de destino celular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Nkx2-1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Nkx2-1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Nkx2-1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Nkx2-1 para la investigación de la señalización de TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Nkx2-1 críticos para la función de TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Nkx2-1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Nkx2-1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1 (m) y el plásmido HDR TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Nkx2-1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Nkx2-1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.